二氧化碳濃度控制
二氧化碳濃度可以通過紅外傳感器(IR)或熱導傳感器(TC)進行測量。兩種傳感器各有優(yōu)缺點。
熱導傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作原理是基于對內腔空氣熱導率的連續(xù)測量,輸入CO2氣體的低熱導率會使腔內空氣的熱導率發(fā)生變化,這樣就會產(chǎn)生一個與CO2濃度直接成正比的電信號。
TC控制系統(tǒng)的一個缺點就是箱內溫度和相對濕度的改變會影響傳感器的精確度。當箱門被頻繁打開時,不僅CO2濃度,溫度和相對濕度也會發(fā)生很大的波動,因而影響了TC傳感器的精度。當需要精確的培養(yǎng)條件和頻繁開啟培養(yǎng)箱門時,此控制系統(tǒng)就顯得不太適用了。
紅外傳感器(IR)它是通過一個光學傳感器來檢測CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個紅外發(fā)射器和一個傳感器,當箱體內的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對應于箱體內CO2的水平,從而可以得出箱體內CO2的濃度。
相對濕度
箱內濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開關門后)才能保證不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。
目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95%左右,但開門后濕度恢復速度很慢)。盡量選擇濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱,因為濕度蒸發(fā)面積越大,越容易達到最大相對飽和濕度并且開關門后的濕度恢復的時間越短。
污染物的控制
二氧化碳培養(yǎng)箱的90℃濕熱滅菌循環(huán)通過了英國健康保護所(HPA)評估,證明這是一個使真菌、細菌孢子和營養(yǎng)細胞失活的有效方法。
污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。
例如,鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養(yǎng)箱免受污染且保證儀器箱體內的生物清潔性,有些公司開發(fā)設計了帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)箱;還有公司設計ULPA高效濾器能過濾培養(yǎng)箱內空氣,可過濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒;此外,90?C濕熱滅菌裝置可以殺死箱內所有污染微生物,甚至芽孢等耐高溫微生物,這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是更有安全保障的。
使用注意事項
1.儀器應放置在平整的地面上,環(huán)境應清潔整齊,干燥通風;
2.不可將流入氣體壓力調至過大,以免沖破管道;